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        Tuner 感受態

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         產品簡介

        Tuner 系列菌株是 lacZY 刪除的 BL21 突變菌株,其中 lacY 的突變使得 IPTG 能夠進入所有細胞的胞 內,從而使得蛋白的誘導

        水平具有 IPTG 的濃度依賴性。當與 pET 系列載體聯合使用時,可使蛋白 的表達量從低表達水平到超高表達水平的范圍內進行

        有效的調節;而在蛋白表達水平低的情況下, 目的蛋白可能會呈現更好的可溶性和活性。因此,Tuner系列菌株的蛋白表達水平

        可以通過IPTG濃 度來進行精確而嚴謹的調控。此外,Tuner 系列菌株還是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。由于該 菌株不含有

        λDE3序列,不表達 T7 RNA 聚合酶,因此不能用于 T7啟動子系列質粒的蛋白表達。經 pUC18 質粒轉化檢測,Tuner 感受態細胞

        的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。

        產品組成組分

        CC96141-01 CC96141-02 CC96141-03 Tuner 化學感受態細胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL

        定制基因型

        F - ompT hsdSB (rB - mB - ) gal dcm lacY1。

        存儲條件

        -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

        質量控制

        無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

        使用方法

        1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

        2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;

        3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;

        4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;

        5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。

        注意事項

        1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用;

        2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;

        3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;

        4. 為確保最高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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