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        NovaBlue (DE3) 感受態

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         產品簡介:

        NovaBlue(DE3)來源于 K12 菌株,具有極高的轉化效率,是轉化效率最高的原核表達菌株,可同時 用于普通質粒的構建和蛋白的原核表達。

        NovaBlue(DE3)菌株染色體 DNA 中整合了噬菌體 λDE3 序 列,使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等質粒的蛋白表

        達。NovaBlue(DE3) 菌株具有四環素抗性,endA1 和 recA1 的突變有利于插入 DNA 的穩定和高純度質粒 DNA 的提; lacZΔM15 突變使

        得 NovaBlue(DE3)可用于藍、白斑實驗篩選。經 pUC18 質粒轉化檢測,NovaBlue (DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA 以上。

        產品組成組分:

        CC96125-01 CC96125-02 CC96125-03 NovaBlue(DE3) 感受態細胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL 。

        定制基因型:

        F - [proA +B + lacI q ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12- mk12+ ) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3)

        存儲條件:

        -80 ℃保存,請勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。

        質量控制:

        無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

        使用方法:

        1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

        2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;

        3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;

        4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;

        5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。

        注意事項:

        1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用

        ; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;

        3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;

        4. 為確保最高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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