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        B834 (DE3) 感受態

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         產品簡介:

        B834 是 BL21 菌株的父系菌株。該系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型,可以用來高水平、高特異性地使用 35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸來標記目的蛋白,以用于蛋白質晶體結構的研究。B834 宿主菌也是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。B834 (DE3)菌株可表達 T7 RNA 聚合酶,因此適用于 pET 系列及其他 T7 啟動子系列的載體。經 pUC18 質粒轉化檢測,B834 (DE3)感受態細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA。

        產品組成 組分:

        CC96126-01 CC96126-02 CC96126-03 B834 (DE3) 化學感受態細胞 10 × 100 μL 100 × 100 μL

        定制基因型:

        F - ompT hsdSB (rB - mB - ) gal dcm met (DE3)。

        存儲條件 :

        -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

        質量控制:

        無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

        使用方法:

        1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

        2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;

        3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;

        4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;

        5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板,于 37 ℃培養箱培養過夜。

        注意事項 :

        1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;

        2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;

        3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;

        4. 為確保最高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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