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                    人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA 試劑盒

                    [批發價格]
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                     包裝規格48T/96T

                    檢測方法:酶聯免疫

                    檢測標本:血清、血漿、尿液、組織勻漿等

                    本試劑盒僅供科研使用!

                    試劑盒組成

                     

                              

                    96孔配置

                    12孔×8

                    48孔配置

                    12孔×4

                      

                     1

                    標準品(500ng/ml)

                    0.5ml

                    0.5ml

                    稀釋即用型

                     2 

                    酶標包被板

                    1

                    1

                    已包被即用型

                     3

                    標準品稀釋液

                    3ml

                    3ml

                    即用型

                     4

                    鏈霉親和素-HRP

                    6ml

                    3ml

                    即用型

                     5

                    30x倍濃縮洗滌液

                    20ml

                    20ml

                    蒸餾水稀釋

                     6

                    生物素標記抗體

                    2ml

                    2ml

                    即用型

                     7

                    顯色劑A

                    6ml

                    3ml

                    即用型

                     8

                    顯色劑B

                    6ml

                    3ml

                    即用型

                     9

                    終止液

                    6ml

                    3ml

                    即用型

                    10

                    說明書

                    1

                    1

                    即用型

                    11

                    封板膜

                    2

                    2

                    不可反復使用

                    12

                    密封袋

                    1

                    1

                    即用型

                    需要而未提供的試劑和器材

                    1.   酶標儀(450nm檢測波長濾光片,570nm630nm校正波長濾光片。

                    2.   洗板機(可調注液量,保證每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。

                    3.   超凈工作臺,生物安全柜,通風柜。

                    4.   高精度單道加液器(量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

                    5.   高精度多道加液器(8道或12道,量程為50-300μl).

                    6.   37℃恒溫箱。

                    7.   低溫離心機。

                    8.   電冰箱(4,-20,-86℃).

                    9.漩渦混合儀,低頻振蕩器等

                    注意事項

                    1 2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

                    2 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

                    3 為避免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。

                    4 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

                    5 底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。

                    6. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸,使用時必須注意安全。

                    7. 各步驟加樣均應使用加樣器,并經常校準其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

                    8. 每次試驗測定的同時做標準曲線,。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔最高濃度的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n)。

                    9. 配制試劑時,要用旋渦混合儀混勻。加入孔內的試劑,充分混勻對測試結果尤為重要,最好使用微量振蕩器(使用最低頻率),如無微量振蕩器,可在反應前手工輕輕晃動酶標板1分鐘,例如做圓周動作,使加入孔中的反應液混勻。

                    10. 實驗用酶標儀應嚴格按使用說明書規范操作,并在使用前充分預熱。

                    11. 手工洗板應注意:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

                     

                    樣本要求

                    1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

                    2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存或根據存放,時間做相應溫度調整,但應避免反復凍融,(由于樣本種類過多,每個單位處理方式不一樣,本說明書不做詳細介紹)。

                     

                    操作程序

                    1 標準品的稀釋:(本試劑系統提供原倍標準品一支,用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋)按下表格執行:

                     250ng/ml

                    5號標準品)

                    120μl的原倍標準品加入120μl的標準品稀釋液

                     125ng/ml

                    4號標準品)

                    120μl5號標準品加入120μl的標準品稀釋液

                       62.5ng/ml

                    3號標準品)

                    120μl4號標準品加入120μl的標準品稀釋液

                      31.2ng/ml

                    2號標準品)

                    120μl3號標準品加入120μl的標準品稀釋液

                      15.6ng/ml

                    1號標準品)

                    120μl2號標準品加入120μl的標準品稀釋液

                     

                    2 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。

                    3 加樣:(詳細操作流程請聯系客服索要說明書

                    4 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋備用。

                    5 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

                    6 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。

                    7 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

                    8 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后10分鐘以內進行。

                     

                    結果判斷

                    1.每個標準品和標本的OD值應減去零孔的OD值。(若不減零孔值,標準曲線的零孔應相交于Y軸)

                    2.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種熟悉應用軟件來計算。

                    3.手工繪制標準曲線。以標準品濃度作橫坐標,OD值作縱坐標,以平滑線連接各標準品的坐標點。通過標本的OD值可在標準曲線上查出其濃度。推薦使用專業制作曲線軟件進行分析計算結果。

                    4.若標本OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。

                     

                     

                     

                     

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